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熒光顯微鏡下的細胞紅綠燈
來源:客戶案例    發(fā)布時間:2022/12/6 10:36:23

熒光顯微鏡下的細胞紅綠燈

近日,“新國標紅綠燈”、“新版紅綠燈”話題引發(fā)熱議,直沖各大平臺熱搜榜,很多人紛紛驚呼這設(shè)計是要搞出大量交通事故,幸好證實是虛驚一場,這種設(shè)計只會在少數(shù)情況下使用,不會推廣。在細胞中,其實也存在運輸系統(tǒng)和紅綠燈,可以用熒光顯微鏡可視化觀察,相關(guān)研究還曾獲2013年諾貝爾獎,比新版紅綠燈有意思,一起來了解下吧!

熒光細胞.jpg


細胞中的“車輛”和“高速公路”

細胞內(nèi)細胞器的定位、遷移和胞內(nèi)物質(zhì)運輸,依賴于馬達蛋白和微管(Microtubule,簡稱MT)的相互作用,前者相當于“車輛”,而后者相當于“高速公路”。2013年詹姆斯·羅斯曼、蘭迪·謝克曼和托馬斯·聚德霍夫3位科學(xué)家因發(fā)現(xiàn)細胞中囊泡轉(zhuǎn)運機制,獲得了2013年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎。


細胞中的高速與車輛.jpg


細胞中的車輛和高速公路①



細胞內(nèi)細胞器的定位、遷移和胞內(nèi)物質(zhì)運輸,依賴于馬達蛋白和微管(Microtubule,簡稱MT)的相互作用,前者相當于“車輛”,而后者相當于“高速公路”。2013年詹姆斯·羅斯曼、蘭迪·謝克曼和托馬斯·聚德霍夫3位科學(xué)家因發(fā)現(xiàn)細胞中囊泡轉(zhuǎn)運機制,獲得了2013年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎。


馬達蛋白.jpg


兩種馬達蛋白在微管上相向而行②



馬達蛋白有非常多種,通常關(guān)注的有兩種,動力蛋白Dynein和驅(qū)動蛋白Kinesin,兩種“車輛”運動方向剛好相反,前者主要負責從細胞的周圍到細胞的中心運載細胞器和囊泡等貨物,后者主要負責從細胞的中心到細胞的中心運載貨物,順便會把前者帶出來。


熒光顯微鏡如何看到細胞中的車輛和公路?


細胞微觀蛋白.jpg


熒光顯微鏡下的細胞微管(紅)和動力蛋白(綠)②



動力蛋白、驅(qū)動蛋白和微管的相關(guān)研究通常在小鼠、果蠅等模式生物或培養(yǎng)細胞上進行,微管可以使用Tubulin紅色熒光標記染色,動力蛋白和驅(qū)動蛋白一般利用GFP標記為綠色,由于觀察目標非常小,因此一般建議使用MF43-N等研究級正置熒光顯微鏡,搭配高放大倍數(shù)、高數(shù)值孔徑的60X油鏡或100X油鏡。


成像延時攝影.jpg


熒光成像延時攝影②



為了觀察和記錄動力蛋白/驅(qū)動蛋白隨時間移動的情況,還需要用到類似MC50-S等高靈敏度的顯微鏡相機,進行延時攝影或視頻錄制,比如每300ms左右拍攝一張圖片或抽取視頻幀,然后多張圖片疊加,即可分析出移動路徑。


細胞交通中的紅綠燈MAPs

神經(jīng)元熒光成像.jpg


明美MC50-S相機下的神經(jīng)元熒光成像



動力蛋白、驅(qū)動蛋白的運輸運動,受微管相關(guān)蛋白MAPs(Microtubule-Associated Protein)調(diào)節(jié),因此MAPs蛋白又被稱為“細胞交通中的紅綠燈”,利用熒光標記技術(shù),可以實現(xiàn)神經(jīng)元的MAPs清晰成像。


神經(jīng)元成像綠.jpg


明美MC50-S相機下的熒光成像




在神經(jīng)細胞領(lǐng)域,目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)MAP2、tau和MAP1b等微管相關(guān)蛋白MAPs會影響動力蛋白、驅(qū)動蛋白,在小鼠活體實驗中單獨敲除單個MAP不一定導(dǎo)致問題,表明這些MAPs可能有互補關(guān)系,就像紅綠燈壞掉其中一個,并不會讓交通信號無法判斷。


細胞紅綠燈.jpg


MAP1B變異(綠)導(dǎo)致神經(jīng)元退化(紅)③



但基因突變等問題導(dǎo)致MAPs異常,就可能引發(fā)神經(jīng)元退化等問題,比如MAP1B變異導(dǎo)致神經(jīng)元退化、tau蛋白異常磷酸化導(dǎo)致阿茲海默癥,這就像紅綠燈異常亮起,紅黃綠全亮,車輛就摸不著頭腦該走還是該停了。


相關(guān)研究還在繼續(xù)深入中


研究級熒光顯微鏡.jpg


熒光顯微鏡MF43-N



“細胞紅綠燈”非常有意思,值得深入,相關(guān)研究還在繼續(xù)進行中,因為需要活細胞成像,因此研究級熒光顯微鏡在其中依舊扮演著重要的角色,如果您有需要進行相關(guān)的研究,我們推薦使用明美MF43-N正置熒光顯微鏡,成像質(zhì)量高,使用方便,近年也有多位老師使用這款顯微鏡完成了高質(zhì)量論文的發(fā)布,您和驚艷的熒光成像效果,可能就只差一通電話和一場試用。
附錄:
①Source:learn.genetics.utah.edu
②DOI:10.1242/jcs.115.7.1453 Source:PubMed
③DOI: 10.1523/JNEUROSCI.2757-14.2015 Source: PubMed
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來源:https://www.mshot.com/article/1547.html


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