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流感的檢測用什么顯微鏡?
來源:客戶案例    發(fā)布時間:2023/4/21 14:15:19

今年的甲型流感可謂來勢洶洶,不僅患者癥狀較重,而且學(xué)生群體感染比例相當(dāng)高,有些中小學(xué)甚至到了無法正常線下教學(xué)的程度,流感的有效檢測和預(yù)防,又再成為關(guān)注焦點,悄悄告訴大家,顯微鏡在這里面可是有重要角色的。

一、認識流感病毒


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流感病毒分甲乙丙丁四型,圖自CDC
流感病毒(Influenza)根據(jù)病毒核蛋白和基質(zhì)蛋白,可分為甲乙丙丁(ABCD)四型,其中對人造成比較大威脅的是甲型(Influenza A)和乙型(Influenza B),對免疫力低下的人群都可能造成致命后果,尤其甲型流感,殺傷力通常比乙型流感更強。
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流感病毒內(nèi)部有HA、NA和基因成分,圖自CDC
甲型流感按血凝素HA和神經(jīng)氨酸酶NA的蛋白結(jié)構(gòu)和基因型進行分型,于是就有了H1N1流感、H3N2流感等分型命名。乙型流感則分為Victoria系和Yamagata系。

我們常看到新聞報道H1N1之類,就屬于甲型流感。甲型流感可以感染禽類、豬、馬、海豹、鯨魚、水貂等動物,如果H5N1等、豬流感突然變異成能夠感染人,那往往會帶來嚴重后果,因為這樣的病原體對人體免疫系統(tǒng)來說是很陌生的,難以應(yīng)對。

二、如何檢測是否感染流感


按2020版的流行性感冒診療方案,以臨床表現(xiàn)(癥狀)結(jié)合一種或以上的病原學(xué)檢測結(jié)果陽性,來判斷確診流感。病原學(xué)檢測主要分抗原檢測、核酸檢測、培養(yǎng)分離和血清學(xué)檢查四種,其中常用的是前面兩種。
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流感常用抗原檢測,但靈敏度低
核酸檢測大家不陌生,就是拭子采樣然后用PCR檢測。抗原檢測大家是否還記得?我們在家就能自己做的那種膠金體檢測就屬于抗原檢測,膠金體抗原檢測屬于低靈敏度檢測,有時候可能檢測不出陽性。
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明美 MF23-M熒光顯微鏡用于呼吸道九聯(lián)檢
在醫(yī)院等醫(yī)療機構(gòu),我們有更高靈敏度、高特異性的抗原檢測方法,免疫熒光法,比如體現(xiàn)為呼吸道七聯(lián)檢或者呼吸道九聯(lián)檢,使用熒光顯微鏡進行觀察判斷。
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呼吸道九聯(lián)檢,可確診甲/乙型流感
顧名思義,呼吸道七聯(lián)檢/九聯(lián)檢是一次同時檢測七種/九種呼吸道病原體,以更快速判斷呼吸道感染情況,其中兩個孔位包括甲型流感和乙型流感。
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流感病毒檢測陰性
使用熒光顯微鏡400倍視野觀察(40X物鏡),甲型流感檢測孔位熒光少且弱,視為陰性結(jié)果,熒光亮度強數(shù)量多,平均每個視野的陽性細胞大于3-5個,就可以判斷為陽性。乙型流感另有一個孔位,判斷標(biāo)準(zhǔn)和甲型流感一致。
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流感病毒檢測陽性
免疫熒光法檢測快速,而且準(zhǔn)確性高于膠金體法,因此得到越來越多醫(yī)療機構(gòu)的選擇。

三、流感病毒如何預(yù)防


預(yù)防流感病毒,首先當(dāng)然還是提倡勤洗手多通風(fēng),然而就是盡量接種疫苗,尤其是以下高危人群:5歲以下兒童、65歲及以上老人、肥胖者、妊娠及圍產(chǎn)期婦女,以及有慢性呼吸系統(tǒng)疾病等基礎(chǔ)疾病的人。
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流感疫苗,圖自CDC
目前國內(nèi)流感疫苗主要有三類,三價滅活(IIV3)、四價滅活(IIV4)和三價減毒活疫苗(LAIV3),都能為甲型流感H1N1、H3N1和乙型流感Victoria系提供保護,四價滅活還能額外保護乙型流感Yamagata系。
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MI52-CF用于疫苗生產(chǎn)細胞培養(yǎng)
那么流感疫苗是怎么制作的呢?首先和很多其他滅活疫苗一樣,有細胞培養(yǎng)生產(chǎn)裂解疫苗工藝。
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細胞培養(yǎng)疫苗工藝,圖自NIAID
裂解疫苗使用細胞培養(yǎng)增殖病毒,再通過裂解,去除大分子蛋白和病毒核酸,僅保留有較高免疫原性的血凝素HA和神經(jīng)氨酸酶NA等蛋白,形成裂解疫苗,這個過程中會使用倒置顯微鏡對細胞培養(yǎng)的情況進行觀察。
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發(fā)達國家的雞蛋培養(yǎng)生產(chǎn)方式
另一種工藝就比較魔性了,用雞蛋培養(yǎng)。這些雞蛋看起來跟我們買的雞蛋差不多,但又不是一般雞蛋,它們?nèi)歉邼崈舳鹊腟PF受精蛋,里面是有雞胚胎的。
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雞蛋培養(yǎng)疫苗工藝,圖自NIAID
上一年兩種流感的基因會在雞蛋清中自然混合,形成適合使用的新流感品種,每個雞蛋可以做出一劑或幾劑疫苗。這個工藝把雞蛋當(dāng)成生物反應(yīng)器用,好處是設(shè)備要求低,因此起步成本低,壞處是生產(chǎn)周期長、產(chǎn)能提升難、以及病毒錯配失效等問題,比如今年流感疫情大大影響雞蛋價格,這種方式就不靈了,這推動了更多企業(yè)要轉(zhuǎn)向細胞培養(yǎng)方式。
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MF31拍攝的流感病毒免疫熒光檢測
總結(jié):流感不僅是一種古老的疾病,還是一種講長期存在、不太可能消失的疾病,對于老人小孩和慢性疾病患者,還是接種疫苗進行保護好,無論選擇三價滅活、四價滅活還是三價減毒,都能為比較高危險的甲型流感提供保護,所以是值得投入的。
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來源:https://www.mshot.com/article/1719.html

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