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熒光顯微鏡應(yīng)用于腫瘤輔助診斷研究
來源:客戶案例    發(fā)布時間:2024/9/2 13:04:22

熒光顯微鏡應(yīng)用于腫瘤輔助診斷研究

【案例背景】

深圳某科研檢測公司需要開展對腫瘤的輔助診斷研究,需要用到熒光原位雜交技術(shù)(Fluorescence In Situ Hybridization, FISH). Mshot明美推薦了研究級熒光顯微鏡MF43-N搭配四通道光源MG-120,可以即開即用提供高質(zhì)量的熒光和明場成像,可以自主選擇和升級熒光激發(fā)塊,可對FISH樣品進行單色熒光或雙色熒光觀察。搭配明美自主研發(fā)的FISH熒光原位雜交分析軟件,快速成像,自動著色,一鍵合成多色熒光圖像,直觀地判斷最終的實驗結(jié)果,功能強大,使用方便,效果得到客戶認(rèn)可。


圖片1.png


【實驗/設(shè)備條件】

防震的工作臺、暗室環(huán)境


【儀器/耗材清單】

明美研究級熒光顯微鏡MF43-N,載玻片,蓋玻片,香柏油


【樣品】

待檢的FISH樣品

【實驗/操作方法】

(一)概述

實驗主要使用明美研究級顯微鏡MF43-N和FISH熒光原位雜交分析系統(tǒng)進行,熒光顯微鏡用于熒光激發(fā)和放大FISH樣品的信號點,F(xiàn)ISH熒光原位雜交分析系統(tǒng)可對熒光顯微圖像進行捕捉和處理。


(二)制樣

FISH樣品一般為手術(shù)組織切片,穿刺組織切片,腫瘤細胞塊等,不同樣品類型,制樣和染色方法會有不同。

①組織切片以HER2常規(guī)石蠟包埋組織切片為例,新鮮樣本取材后經(jīng)過固定、水洗、脫水、透明、浸蠟、包埋、切片和烘烤制備成常規(guī)切片,過程中特別注意固定和切片,樣品厚度保持在3-5um最佳。染色可分為預(yù)處理、雜交、洗滌、復(fù)染四步,尤其注意預(yù)處理的脫蠟、煮片、酶消化,以及雜交中的變性(加熒光探針)。

②細胞學(xué)樣品以產(chǎn)前染色體數(shù)目檢查為例,制樣經(jīng)過低滲、預(yù)固定、滴片三步,需要充分的低滲和合適的細胞密度,可能需要用到倒置顯微鏡相襯觀察來控制細胞密度。染色也可分為預(yù)處理、雜交、洗滌、復(fù)染四步,預(yù)處理的消化和充分洗滌比較影響成像效果。


(三)觀察

①將制樣好的玻片放上載物臺,用樣品夾固定,在蓋玻片上滴一滴香柏油。

②把明美熒光顯微鏡的激發(fā)光切換到紫外熒光,物鏡切換到100X的油鏡,調(diào)節(jié)調(diào)焦機構(gòu)使物鏡與香柏油接觸,然后左右微微旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)盤,使物鏡與香柏油充分接觸,排出空氣,然后進行對焦

③選擇合適的樣品區(qū)域,分別用紫外、藍色和綠色激發(fā)光觀察FISH樣品,然后用明美FISH熒光原位雜交分析系統(tǒng)分別進行采圖,最后在軟件上對圖片進行合成處理,得到最終所需的FISH樣品圖片。


圖片2.png

MF43-N+MSX11拍攝的FISH圖片

FISH樣品在紫外激發(fā)光的照射在,顯現(xiàn)出藍色的細胞輪廓的信號,在藍色激發(fā)光的照射下在細胞內(nèi)顯現(xiàn)出綠色的探針信號,在綠色激發(fā)光的照射下在細胞內(nèi)顯現(xiàn)出紅色的探針信號。


【實驗結(jié)果/結(jié)論】

選擇細胞核邊界完整、無重疊,標(biāo)記的紅色信號和標(biāo)記的綠色信號清晰的細胞,隨機計數(shù)至少20個細胞核中雙色信號。判斷信號點有無分離或者有無擴增等,并在專業(yè)的病理醫(yī)師或技術(shù)人員的指導(dǎo)下對結(jié)果進行判讀,保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。明美研究級正置熒光顯微鏡MF43-N采用優(yōu)良的無限遠光學(xué)系統(tǒng),搭配四通道光源MG-120,熒光激發(fā)信號強,并且可以即開即用,可以選配單通或雙通熒光激發(fā)塊,可供選擇的熒光波段繁多且亮度高,可滿足FISH領(lǐng)域的研究需要,也應(yīng)用于生物制藥,醫(yī)學(xué)檢測、疾病預(yù)防等領(lǐng)域內(nèi)的熒光檢測。


【場景圖/實拍效果圖】


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圖片4.png圖片5.png

熒光顯微鏡MF43-N,現(xiàn)場拍攝的FISH樣品效果圖


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來源:https://www.mshot.com/article/2058.html

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